紫外可見分光光度計是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室中常用的分析儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物、環(huán)境等領(lǐng)域的分析與研究工作中。為了確保其測量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性,定期的校準(zhǔn)是不可少的。以下是對紫外可見分光光度計校準(zhǔn)方式的詳細(xì)描述:
一、波長準(zhǔn)確度和波長重復(fù)性校準(zhǔn)
1. 使用標(biāo)準(zhǔn)燈:利用具有特征發(fā)射譜線的標(biāo)準(zhǔn)燈(如汞燈、氘燈)進(jìn)行波長的準(zhǔn)確性校準(zhǔn)。這些標(biāo)準(zhǔn)燈能夠提供已知波長的光,通過比較儀器測量的波長與標(biāo)準(zhǔn)波長,可以確定儀器的波長準(zhǔn)確性。
2. 校正偏移:如果檢測到波長偏移,應(yīng)根據(jù)儀器說明書調(diào)整波長刻度,確保波長讀數(shù)的準(zhǔn)確性。
3. 波長重復(fù)性測試:在相同條件下多次測量同一波長,檢查測量結(jié)果的重復(fù)性。波長重復(fù)性好的儀器能夠提供更穩(wěn)定的測量結(jié)果。
二、透射比準(zhǔn)確度和透射比重復(fù)性校準(zhǔn)
1. 準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)溶液:選擇與儀器波長范圍相匹配的標(biāo)準(zhǔn)溶液,如在紫外區(qū)域常用的硝酸鉀溶液,在可見區(qū)域常用的重鉻酸鉀溶液。這些溶液應(yīng)具有高純度,以減少雜質(zhì)對校準(zhǔn)結(jié)果的影響。
2. 配制標(biāo)準(zhǔn)溶液:使用精密天平準(zhǔn)確稱量所需標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并按照推薦濃度準(zhǔn)確配制溶液。選擇適宜的溶劑溶解標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),確保溶劑對測定無干擾,并保證溶液的穩(wěn)定性。
3. 透光率校準(zhǔn):使用透光率接近100%的樣品(如純凈溶劑)進(jìn)行基線校正,確保透光率讀數(shù)的準(zhǔn)確性。
4. 吸光度校準(zhǔn):使用標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行吸光度校準(zhǔn),調(diào)整儀器的吸光度讀數(shù),使其與標(biāo)準(zhǔn)溶液的已知吸光度一致。
5. 透射比準(zhǔn)確度和重復(fù)性測試:在多個波長處連續(xù)測量標(biāo)準(zhǔn)溶液的透射比,與標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行比較,計算透射比準(zhǔn)確度和重復(fù)性。
三、基線穩(wěn)定性檢查
1.基線漂移檢查:在沒有樣品的情況下,全波段掃描,檢查基線是否平穩(wěn)。若基線漂移過大,需檢查儀器性能。
2. 溫度影響檢查:確保儀器所在環(huán)境溫度穩(wěn)定,因?yàn)闇囟炔▌涌赡軐?dǎo)致基線漂移。
四、重復(fù)性和線性檢查
1. 重復(fù)性測試:多次測量同一標(biāo)準(zhǔn)溶液,檢查測量結(jié)果的重復(fù)性,確保儀器的測量精度。
2. 線性范圍測試:使用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,檢查儀器在不同濃度下的線性響應(yīng),確保儀器在整個測量范圍內(nèi)的線性。
五、記錄和驗(yàn)證
1. 詳細(xì)記錄:記錄校準(zhǔn)過程中的所有操作,包括標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制、校準(zhǔn)結(jié)果、儀器參數(shù)的調(diào)整等。
2. 驗(yàn)證效果:校準(zhǔn)后,使用獨(dú)立來源的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行驗(yàn)證,確保校準(zhǔn)效果滿足測量要求。
六、定期再校準(zhǔn)
1. 定期執(zhí)行:根據(jù)儀器使用頻率和制造商建議,定期進(jìn)行校準(zhǔn),確保儀器始終處于最佳狀態(tài)。
2. 遇到問題時再校準(zhǔn):若發(fā)現(xiàn)測量結(jié)果異?;蜻M(jìn)行了重大維修,應(yīng)立即進(jìn)行再校準(zhǔn)。